产品货号:
SNM309
中文名称:
α-淀粉酶测试盒(淀粉-碘比色法)
英文名称:
α-Amylase Assay Kit
产品规格:
100管/96样
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒可测各种动物血清(浆)、组织等样本中α-淀粉酶活性。
α-淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦牙糖及糊精,在底物浓度已知并且过量的情况下,加入碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物,根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量,从而计算出AMS的活力。
保存:4℃,避光
0.01mol/L碘应用液的配制:
按碘贮备液︰双蒸水=1︰9稀释,现用现配,4℃避光保存。
一、血清(浆)样本
二、组织样本
相关搜索:α-淀粉酶测试盒(淀粉-碘比色法),α-淀粉酶,AMS,α-Amylase Assay Kit
α-淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦牙糖及糊精,在底物浓度已知并且过量的情况下,加入碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物,根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量,从而计算出AMS的活力。
组分 | 规格 |
试剂一:底物缓冲液(0.4mg/mL) | 60mL |
试剂二:碘贮备液(0.1mol/L) | 7mL |
保存:4℃,避光
- 按步骤做完后,空白管应为蓝棕色,测定管颜色稍浅。需要注意的是,测定管如果为黄色,则该样本浓度偏高,需加大样本稀释倍数后再测,否则计算结果偏低。
- 不同样本α-淀粉酶活力差异很大,食靡样本差异最大(从几十倍到几千倍稀释不等),需要指出的是大鼠、小鼠血清需要稀释50~100倍后测定。
0.01mol/L碘应用液的配制:
按碘贮备液︰双蒸水=1︰9稀释,现用现配,4℃避光保存。
- 底物缓冲液37℃预温5分钟。
- 按下表加入各成分:
成分 测定管 空白管 预温后的底物缓冲液 0.5mL 0.5mL 待测样本 0.1mL - 混匀,37℃水浴,准确反应7.5分钟。
- 按下表加入各成分:
成分 测定管 空白管 0.01mol/L碘应用液 0.5mL 0.5mL 双蒸水 3.0mL 3.1mL - 混匀,660nm波长,1cm光径,双蒸水调零,测各管吸光度。
一、血清(浆)样本
- 单位定义:
100mL血清(浆)中的AMS,在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉为1个单位。 - 计算公式:
C底物液:底物液浓度,0.4mg/mL;V底物液:底物液加入量,0.5mL;AMS活力
(U/dL)= A空白-A测定 × C底物液×V底物液 × 30 × 100 ×N A空白 10 T V样
T:反应时间,7.5min;V样:取样量,0.1mL;N:样本测试前稀释倍数。 - 计算举例:
取某人血清用生理盐水10倍稀释后取样0.1mL做AMS测定,测定管OD为0.308,空白管OD为0.383,则计算结果如下:AMS活力
(U/dL)= 0.383-0.308 × 0.4×0.5 × 30 × 100 ×10 0.308 10 7.5 0.1 = 156.658U/dL
二、组织样本
- 单位定义:
组织中每毫克蛋白在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉定义为1个淀粉酶活力单位。 - 计算公式:
C底物液:底物液浓度,0.4mg/mL;V底物液:底物液加入量,0.5mL;AMS活力
(U/mgprot)= A空白-A测定 × C底物液×V底物液 × 30 ÷(V样×Cpr) A空白 10 T
T:反应时间,7.5min;V样:取样量,0.1mL;
Cpr:组织匀浆蛋白浓度,mgprot/mL(prot是指蛋白)。 - 计算举例:
- 例1,取1%大鼠肺匀浆0.1mL做AMS测定,测定管OD为0.275,空白管OD为0.383,1%大鼠肺匀浆的蛋白浓度为0.5677mgprot/mL,则计算结果如下:
AMS活力
(U/mgprot)= 0.383-0.275 × 0.4×0.5 × 30 ÷(0.1×0.5677) 0.383 10 7.5 = 0.3973U/mgprot - 例2,取2.5%鱼肠匀浆0.1mL做AMS测定,测定管OD为0.174,空白管为0.388,2.5%鱼肠匀浆的蛋白浓度为0.5960mgprot/mL,则计算结果如下:
AMS活力
(U/mgprot)= 0.388-0.274 × 0.4×0.5 × 30 ÷(0.1×0.596) 0.388 10 7.5 = 0.3944U/mgprot
- 例1,取1%大鼠肺匀浆0.1mL做AMS测定,测定管OD为0.275,空白管OD为0.383,1%大鼠肺匀浆的蛋白浓度为0.5677mgprot/mL,则计算结果如下:
相关搜索:α-淀粉酶测试盒(淀粉-碘比色法),α-淀粉酶,AMS,α-Amylase Assay Kit