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α-淀粉酶测试盒(淀粉-碘比色法)图片
产品货号:
SNM309
中文名称:
α-淀粉酶测试盒(淀粉-碘比色法)
英文名称:
α-Amylase Assay Kit
产品规格:
100管/96样
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒可测各种动物血清(浆)、组织等样本中α-淀粉酶活性。


α-淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦牙糖及糊精,在底物浓度已知并且过量的情况下,加入碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物,根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量,从而计算出AMS的活力。


组分规格
试剂一:底物缓冲液(0.4mg/mL)60mL
试剂二:碘贮备液(0.1mol/L)7mL

保存:4℃,避光


  • 按步骤做完后,空白管应为蓝棕色,测定管颜色稍浅。需要注意的是,测定管如果为黄色,则该样本浓度偏高,需加大样本稀释倍数后再测,否则计算结果偏低。
  • 不同样本α-淀粉酶活力差异很大,食靡样本差异最大(从几十倍到几千倍稀释不等),需要指出的是大鼠、小鼠血清需要稀释50~100倍后测定。



0.01mol/L碘应用液的配制:
按碘贮备液︰双蒸水=1︰9稀释,现用现配,4℃避光保存。


  • 底物缓冲液37℃预温5分钟。
  • 按下表加入各成分:
    成分测定管空白管
    预温后的底物缓冲液0.5mL0.5mL
    待测样本0.1mL

  • 混匀,37℃水浴,准确反应7.5分钟。
  • 按下表加入各成分:
    成分测定管空白管
    0.01mol/L碘应用液0.5mL0.5mL
    双蒸水3.0mL3.1mL

  • 混匀,660nm波长,1cm光径,双蒸水调零,测各管吸光度。



一、血清(浆)样本
  • 单位定义:
    100mL血清(浆)中的AMS,在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉为1个单位。
  • 计算公式:
    AMS活力
    (U/dL)
    A空白-A测定×C底物液×V底物液×30×100×N
    A空白10TV
    C底物液:底物液浓度,0.4mg/mL;V底物液:底物液加入量,0.5mL;
    T:反应时间,7.5min;V:取样量,0.1mL;N:样本测试前稀释倍数。
  • 计算举例:
    取某人血清用生理盐水10倍稀释后取样0.1mL做AMS测定,测定管OD为0.308,空白管OD为0.383,则计算结果如下:
    AMS活力
    (U/dL)
    0.383-0.308×0.4×0.5×30×100×10
    0.308107.50.1
    156.658U/dL


二、组织样本
  • 单位定义:
    组织中每毫克蛋白在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉定义为1个淀粉酶活力单位。
  • 计算公式:
    AMS活力
    (U/mgprot)
    A空白-A测定×C底物液×V底物液×30÷(V×Cpr)
    A空白10T
    C底物液:底物液浓度,0.4mg/mL;V底物液:底物液加入量,0.5mL;
    T:反应时间,7.5min;V:取样量,0.1mL;
    Cpr:组织匀浆蛋白浓度,mgprot/mL(prot是指蛋白)。
  • 计算举例:
    • 例1,取1%大鼠肺匀浆0.1mL做AMS测定,测定管OD为0.275,空白管OD为0.383,1%大鼠肺匀浆的蛋白浓度为0.5677mgprot/mL,则计算结果如下:
      AMS活力
      (U/mgprot)
      0.383-0.275×0.4×0.5×30÷(0.1×0.5677)
      0.383107.5
      0.3973U/mgprot

    • 例2,取2.5%鱼肠匀浆0.1mL做AMS测定,测定管OD为0.174,空白管为0.388,2.5%鱼肠匀浆的蛋白浓度为0.5960mgprot/mL,则计算结果如下:
      AMS活力
      (U/mgprot)
      0.388-0.274×0.4×0.5×30÷(0.1×0.596)
      0.388107.5
      0.3944U/mgprot

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